A Coombs-teszt

Mi az a Coombs-teszt?

A Coombs-tesztet a vörösvértestek (vörösvértestek) elleni antitestek kimutatására használják. Az ellenanyagok meghatározására ún. Coombs szérumot használnak, amelyet nyulak szérumából nyernek és az emberi antitestekre érzékenyítik.
A tesztet akkor alkalmazzák, ha hemolitikus vérszegénység, rhesus inkompatibilitása vagy röviddel a vérátömlesztés gyanúja előtt állnak rendelkezésre. A hemolitikus vérszegénység a vérszegénység egyik formája, és a rhesus összeférhetetlenség a vércsoportok összeférhetetlenségét írja le.
A Coombs-tesztnek kétféle típusa létezik: a közvetlen és közvetett teszt eltér a jelzés és a végrehajtás szempontjából.

A Coombs-teszt okai

A közvetlen Coombs-tesztet akkor kell alkalmazni, ha hemolitikus vérszegénység gyanúja merül fel. A hemolitikus vérszegénység olyan anémiát ír le, amelyben a vérsejtek károsodás miatt idő előtt lebontják.
Autoimmun betegségek, például szisztémás lupus erythematosus, rheumatoid arthritis vagy krónikus lymphocytás leukémia esetén antitestek képződnek, amelyek a test saját vérsejtjeivel (úgynevezett eritrocitákkal) szemben irányulnak. Az antitestek kötődése a vérsejtek korai lebomlásához vagy a vérsejtek összerakódásához vezet az erekben. Mindkettő a hemoglobin-érték csökkenéséhez vezet.

A közvetlen Coombs-teszt másik indikációja a haemolyticus neonatorum betegség, ahol a rhesus-negatív anya testében a rhesus faktor elleni antitestek képződnek. Ha a születendő gyermek rhesus-pozitív, akkor az anyából származó ellenanyagok bejuthatnak a magzat keringésébe, és megindíthatják az ott levő vérsejtek fokozott lebontását. Az újszülöttek súlyos vérszegénységgel és sárgasággal emelkednek ki.

A Coombs-tesztet rendszeresen alkalmazzák a transzfúziós gyógyászatban. A vércsoportok meghatározására szolgál a vérátömlesztés előtt (éjszakai teszt), amelyben egy kis vérmintát kevernek az A, B, AB és 0 vércsoport különféle szérumaival. Ha a vér folyékony marad, akkor a beteg vére kompatibilis a megfelelő vércsoporttal. A transzfúzió elvégezhető.

Az indirekt Coombs-teszt felhasználható szabad antitestek keresésére is a beteg testében (antitest-keresési teszt), pl. az anyasági ellenőrzések során, onkológiai betegek vagy vérátömlesztésen részesülő emberek transzfúziójának előkészítése során.

Tudjon meg többet a témáról itt: Rh intolerancia.

Az előkészület

A Coombs-teszt előkészítésekor először elkészítik a szérumokat antitestekkel, amelyeket meg kell vizsgálni. Különböző tesztcsövekbe töltik őket vagy tesztkártyákra helyezik őket.

A mindennapi klinikai gyakorlatban pl. az éjjeli teszttel már készítettek tesztkártyákat, amelyek azonnal felhasználhatók. Ezután vért vesznek a betegből és előkészítik a teszthez. Attól függően, hogy milyen típusú Coombs-tesztet végeznek, szükség van a beteg vérsejteire vagy szérumára (a vér folyékony része).

A szekvencia

Közvetlen Coombs-teszt esetén a vörösvértesteket kiszűrjük a beteg véréből. Vizsgálni kell, hogy vannak-e IgG típusú antitestek, amelyek hemolitikus vérszegénységet vagy vércsoportok inkompatibilitását okozzák a szervezetben. A Coombs szérum humán IgG ellenanyagok elleni antitesteket tartalmaz. Az elegyet hosszú ideig melegítjük (inkubáljuk). Ha vannak antitestek a vörösvértesteken, akkor összerakódnak, és a teszt pozitívvá válik.

A közvetett Coombs-teszt két részből áll. A cél az ellenanyagok meghatározása, amelyek szabadon vannak a vérben és nem kötődnek a vérsejtekhez.
Ezúttal a folyékony részt (szérum) kiszűrjük a beteg véréből. Először vörösvérsejteket adunk a szérumhoz a vizsgálathoz. Ha a szérumban vannak szabad ellenanyagok, akkor ezek kötődnek a vörösvértestekhez. Ez a reakció nem látható. Csak a második lépésben, mint a közvetlen Coombs-tesztnél, hozzáadunk és felmelegítünk Coombs-szérumot humán ellenanyagok elleni antitestekkel. A megoldás itt is összeomlik, ha az eredmény pozitív.

Az értékelés

Ha az ellenanyagokat megfelelő Cooms-szérummal kombináljuk, akkor a szérumban (a vér folyékony részében) található antitestek kötődnek a beteg antitesteivel. Az antitestek Y-alakúak, ami azt jelenti, hogy mindig képesek kötni két kötőpartnert és így keresztválasztani a vörösvértesteket egymással. A vérsejtek nagy felhalmozódása jön létre. Ezek a csomók láthatóvá válnak - a vér agglutinálódik (csomók) és a teszt pozitív.
Ha a betegnek nincs megfelelő antitestje, akkor a szérum folyékony marad. Nem látsz változást - a teszt negatív.

Melyek az alternatívák?

A Coombs-teszt alternatívája az immunológiai ELISA módszer (enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat), amelyben bizonyos antitesteket enzimmel jelölnek. Ezt az ellenanyagot hozzáadjuk a tesztoldathoz. Ha a jelölt antitestek reagálnak a tesztoldatban levő antitestekkel, akkor a kötött enzimet aktiválják és festéket állítanak elő. A megfelelő kémcsövek megváltoztatják a színt - a teszt pozitív.

Az ELISA eljárás mellett van egy WESTERN blot is, amelyet gyakran pozitív ELISA megerősítő tesztjeként használnak.